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紫外交聯儀經常應用的實驗

更新時間:2024-07-24      點擊次數:1719
  威尼德紫外交聯儀:在Northern blotting、Southern blotting、EMSA等尼龍膜、硝酸纖維素膜的交聯、Sterilization(滅菌)、DNA Nicking(DNA缺失)的應用。
 
  紫外交聯技術是一種常用于材料科學和化學領域的重要技術手段。隨著材料研究的不斷深入,紫外交聯儀逐漸成為了廣泛應用的分析設備。
 
  紫外交聯儀利用紫外光對材料進行照射,通過能量的輸入和材料分子之間的相互作用,實現材料的共價鍵形成或斷裂。當紫外光照射在材料上時,光能激發材料內部的電子,使其躍遷到較高的能級。這些激發態的電子會與周圍的分子發生相互作用,進而導致化學鍵的形成或斷裂,從而實現材料的交聯或解交聯。
 
  紫外交聯儀在材料科學中有廣泛的應用。首先,在涂料和粘合劑領域,可用于評估和控制材料的交聯程度,從而影響材料的硬度、耐久性和附著力。其次,在聚合物材料領域,可用于研究聚合反應的動力學過程,確定較佳交聯條件和優化聚合物的性能。此外,還可應用于紡織品、電子器件、醫療器械和涂層等領域。
 
  紫外交聯儀作為一種分析設備,在材料科學中具有多個優勢。首先,操作簡單、速度快,可實時監測交聯反應的進行,提高研究效率。其次,具有較高的靈敏性和準確性,可以對微小的交聯變化進行檢測和測量。另外,不需要添加化學試劑,對樣品無損傷,適用于各種材料的表面和體積分析。
 
  紫外交聯儀作為一種重要的分析設備,在材料科學中發揮了重要作用。它通過紫外光的照射實現材料的交聯或解交聯,應用廣泛。它具有操作簡單、速度快、靈敏性高等優勢,能夠實時監測交聯過程,并對材料的性能進行評估和控制。隨著技術的不斷發展,它在材料科學中的應用前景將更加廣闊。
 
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        1.Membrane Blotting(膜印跡)
 
  威尼德生物科技(北京)有限公司VL系列紫外交聯儀可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交聯,當使用254 nm波長、能量為120.0mJ/cm2交聯時,尼龍模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之間形成共價鍵穩定。
 
  (1)將一張或兩張用轉移緩沖液(如10×SSC)輕輕潤濕的吸水紙放在VL系列紫外交聯儀的樣品腔。將尼龍膜放在吸水紙上,使附著核酸的一面朝上,使紫外線燈管能夠直接照射核酸。
 
  (2)關閉VL系列紫外交聯儀的門。
 
  (3)按下Run/Pause(運行/暫停)按鍵啟動,當紫外線燈管亮時,顯示屏將立即開始從輸入值開始累計。如果在曝光期間的任何點打開門,照射將停止,并顯示已曝光值。(關上門按Run/Pause按鍵繼續照射。)
 
  (4)輻照完成后,蜂鳴器將鳴響約3–4秒。自動交聯大約需要25–50秒。
 
  (5)取下尼龍膜并關上門,交聯完成。每次使用后,清潔紫外線交儀樣品腔,以清除殘留的鹽。
 
  2.DNA Nicking(DNA缺失)
 
  威尼德生物科技(北京)有限公司紫外線交聯劑也可用于切割溴化乙錠染色的瓊脂糖凝膠中的DNA,代替HCl洗滌液,瓊脂糖凝膠中比較大的DNA(>20kb)的轉模效率很低,因此DNA在轉移到尼龍膜之前需要進行前處理。DNA可通過HCl或紫外線照射進行切割。HCl脫嘌呤反應較難控制,且對溫度極為敏感。所以在轉移前,在短波長紫外光(254 nm)中80.0mJ/cm2切割DNA的方法更可靠。
 
  3.Sterilization(滅菌)
 
  紫外線殺菌就是通過紫外線照射,破壞及改變微生物的DNA(脫氧核糖核酸)結構,使細菌當即死亡或不能繁殖,達到殺菌的目的。真正具有殺菌作用的是UVC紫外線,因為C波段紫外線很容易被生物體的DNA吸收,尤其是254nm波長左右紫外線最佳。紫外線殺菌屬于純物理消毒方法,具有簡單便捷、光譜高效、無二次污染。因此在短波長紫外光(254 nm)中滅菌95sec。
 
  4.RecA Screening(RecA篩選)
 
  紫外線交聯劑也可用于篩選RecA突變體,在短波長紫外光(254 nm)中40.0mJ/cm2照射下,recA突變體阻止了紫外線誘導損傷的修復,阻止了紫外照射過的過的recA細胞的生長。
 
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